zastosowanie baniek lekarskich

Kasetę opornościową neomycyny napędzaną promotorem PGK flankowaną przez miejsca loxP i poprzedzona miejscem EcoRI wstawiono do miejsca Smal w odległości 262 pz poniżej egzonu 2. Konstrukt elektroporowano do mysich komórek ES w R1. Klony oporne na neomycynę analizowano metodą Southern blotting DNA komórki ES z trawionym EcoRI. Prawidłowo ukierunkowane komórki ES transfekowano plazmidem eksprymującym rekombinazę Cre. Zdarzenia rekombinacyjne usuwające ekson 2, jak również kasety oporności na neomycynę zidentyfikowano po hybrydyzacji Southerna genomowego DNA strawionego EcoRI. Jeden z pozytywnych klonów wstrz...