poradnia ginekologiczna mysłowice

Ponadto zwierzęta często wykazywały równoczesne ruchy w przód obu tylnych kończyn. W spoczynku, pień i ogon nie były unoszone, a łapy kontaktowały się z podłożem z większością powierzchni podeszwy (Ryc. 1E), zamiast pokazywać zwykłe położenie palców. Myszy z niedoborem REEP1 wykazywały również spastyczny klonus podczas wykonywania trudnych wyzwań, takich jak wspinanie się po pochyłej drabinie (Supplemental Video 2). Połączenie osłabienia i spastyczności kończyn tylnych, wraz z wyraźnym oszczędzeniem kończyn przednich, silnie przypomina kliniczne objawy ludzkich pacjentów z HSP i tym samym definiuje nasze myszy z nokautem REEP1 jako klinicznie prawidłowy model choroby. Zaburzenia czynności chodu u myszy z niedoborem REEP1 postępują z wiekiem i charakteryzują się zwyrodnieniem aksonalnym w rdzeniu kręgowym. Określiliśmy zakres i postęp fenotypu ruchu w naszym modelu myszy, mierząc kąt podstawy stopy w czasie. Znaczący spadek zaobserwowano po raz pierwszy w 16-tygodniowym Reep1. /. myszy. W szczególności Reep1 + /. dotknięte były również zwierzętami, ale później, w mniejszym stopniu. W wieku 20 tygodni, zarówno Reep1. /. i Reep1 + /. myszy wykazywały silne upośledzenie (Figura 2, A i B). Figura 2 Fenotyp nokautu REEP1 jest progresywny, zależny od dawki i związany jest raczej z neurodegeneracją niż patologią neurorozwojową wyższych aksonów neuronu ruchowego. (A) Pomiar kąta nachylenia podstawy. Pokazane są obrazy 20-tygodniowych myszy tuż przed podniesieniem tylnej łapy. (B) Zależność genotypu od kąta podstawy stopy w czasie. Paski błędów przedstawiają SEM. * P <0,05 (dwuczynnikowa ANOVA). (C) serynowe odcinki przewodu korowo-rdzeniowego w rdzeniu kręgowym 30-tygodniowych myszy na poziomie lędźwiowym. Strzałka i gwiazdka oznaczają struktury patologiczne, które są przeplatane między morfologicznymi nienaruszonymi aksonami Reep1. /. ale nie myszy Reep + / +. Skala słupków: .m. (D) Ultrastrukturalna charakterystyka patologii podświetlona w C. Ciemne struktury są wypełnione materiałem gęstym elektronowo (lewy panel); Struktury wakuolarne to obszary pozbawione materiału komórkowego (prawy panel). Obecność osłonek mielinowych (grotów strzałek) wskazuje na początek aksonów. Skalowane pręty: 400 nm. (E) Ciała neuronalne w kory ruchowej 13-miesięcznych Reep1 + / + i Reep1. /. myszy zidentyfikowano przez immunoreaktywność NeuN. Paski skali: 200 .m. (F) Kwantyfikacja warstwowa nie wykazała utraty neuronów w Reep1. /. myszy. Paski błędów przedstawiają SEM. (G) Niższe neurony ruchowe nie biorą udziału w ocenie na podstawie CMAPs po stymulacji nerwu kulszowego zapisanej w mięśniach triceps surae. Paski błędów przedstawiają SEM. (H) Neurony korowe uzyskane ze szczeniaków P1 i hodowane przez 3 dni. Neurytów wizualizowano za pomocą falloidyny (Phl). Aksony znakowano przez pan-aksonalny znacznik neurofilamentu SMI312 (SMI). Skalowane pręty: 50 .m. (I) Kwantyfikacja długości najdłuższego rzutu aksonalnego każdego neuronu. Paski błędów przedstawiają SEM. Przekroje rdzenia kręgowego na poziomie lędźwiowym w 30-tygodniowym Reep1. /. myszy ujawniły dowody degeneracji aksonów w korowo-rdzeniu (ryc. 2, C i D). Nie stwierdzono jednak utraty neuronu neuronów kory mózgowej nawet w 13 miesiącu życia (ryc. 2, E i F). Biorąc pod uwagę mniejsze zaangażowanie neuronu ruchowego w mysim modelu SPG7 (19, 20) oraz u pacjentów z toksycznym allelem REEP1 o zwiększonej aktywności (21), zmierzyliśmy potencjał czynnościowy mięśni (CMAP) w mięśniach triceps sura, jako zmiany w tym parametrze korelowano z przedkliniczną utratą aksonów neuronów motorycznych rdzenia kręgowego w modelu mysim dla stwardnienia zanikowego bocznego (22). Wspierając odkrycie, że niższe neurony ruchowe nie uległy zmianie, CMAP w Reep + /. i Reep1. /. zwierzęta nie różniły się od tych w grupach kontrolnych Reep1 + / + nawet 10 tygodni po wystąpieniu zaburzeń chodu (Figura 2G). Aby rozwiązać problem, czy przerost aksonu jest osłabiony przy braku REEP1, wyizolowaliśmy neurony korowe z myszy P1 i neuronów motorycznych rdzenia kręgowego z embrionów E12,5 i oszacowaliśmy długość aksonu po 3 (neurony korowe) lub 5 (neurony ruchowe rdzenia kręgowego ) odpowiednio w dniach kultury [hasła pokrewne: rezonans magnetyczny kraków cena, katalog oriflame 17 2014, katalog oriflame 3 2015 ]