praca fizjoterapeuta sieradz

Ponadto ekspresja zewnątrzwydzielniczych markerów nie zwiększyła się, podczas gdy markery komórek nie zmniejszyły się po wycięciu. W rzeczywistości, jak opisano poniżej, wyrażenie zestawu. markery specyficzne dla komórek zwiększały się po wycięciu. Łącznie, zarówno przed, jak i po delecji transgenów, wzór ekspresji genu obserwowany w komórkach EndoC-aH2 jest zgodny z ludzkim. komórki. Rycina 4 Wizualizacja mapy żywienia w profilowaniu ekspresji genów w wyciętym i nieodciętym EndoC-P H2 w porównaniu z ludzkimi wysepkami i zewnętrzną linią komórkową. (A) Wyrażenie genów istotnych dla. funkcja komórki w wizualizacji mapy ciepła. Mapa ciepła pokazuje intensywność logów w 3 próbkach zestawów nieobciętych lub wyciętych komórek EndoC-H2, ludzkich wysepek (42) i trzustkowej linii zewnątrzwydzielniczej SKPC. W przypadku genów reprezentowanych przez kilka zestawów sond zastosowano zestaw sond z najwyższą zmianą złożenia. Większość genów jest wysoce ekspresjonowana w człowieku. linia komórkowa EndoC-P H2 i w próbkach wyspowych, ale nie w zewnątrzwydzielniczej linii komórkowej SKPC. (B) Ekspresja genów markerów zewnątrzwydzielniczych w wizualizacji mapy ciepła. Mapa ciepła pokazuje intensywność logów w 3 próbkach zestawów nieobciętych lub wyciętych komórek EndoC-H2, ludzkich wysepek (42) i trzustkowej linii zewnątrzwydzielniczej SKPC. Listy genów zostały wygenerowane przy użyciu opublikowanych danych transkryptomicznych (43), danych literaturowych i instrukcji obsługi. W przypadku genów reprezentowanych przez kilka zestawów sond zastosowano zestaw sond z najwyższą zmianą złożenia. Większość genów nie wyraża się w człowieku. Próbki EndoC-P H2 w linii komórkowej (wycięte lub nie), ale w próbkach wyspowych. Funkcja komórki EndoC-P2 po wycięciu transgenu. Dwadzieścia jeden dni po transdukcji komórek EndoC-aH2 z wektorem lentiwirusowym eksprymującym Cre, obserwowaliśmy gwałtowny wzrost poziomów mRNA insuliny (Figura 5A). Takiego wzrostu poziomów mRNA insuliny nie obserwowano, gdy komórki były transdukowane wektorem lentiwirusowym eksprymującym GFP (Figura 5A). W porównaniu z wcześniej opublikowaną linią EndoC-aH1, nieakceptowane komórki EndoC-aH2 eksprymowały 4,1-krotnie mniej mRNA insuliny. Jednak po wycięciu komórki EndoC-aH2 uległy ekspresji 2,9-krotnie więcej mRNA insuliny niż EndoC-AH1 (Figura 5A). Na poziomie białka, cięcie z udziałem Cre zwiększało intensywność immunobarwienia insuliny w porównaniu z komórkami nieuwikłanymi (Figura 5B). Co ciekawe, rzadkie komórki, które pozostały pozytywne Ki67, były niskimi pod względem immunobarwienia insuliny (Figura 5C). Zawartość insuliny wzrosła prawie 20-krotnie 21 dni po transdukcji Cre z początkowej zawartości 62. 2,3 ng na milion komórek do 1,98. 0,048 g na milion komórek (Figura 5D). Co więcej, analizy RT-QPCR wskazały, że ekspresja wielu genów jest związana z. funkcja komórki wzrastała po delecji transgenu pośredniczonej przez Cre. Tak było w przypadku IAPP, SLC2A2, KCNJ11, ABCC8 i RAB3A (rysunek 5E). Tak było również w przypadku wielu czynników transkrypcyjnych, takich jak MAFA, GLIS3, NKX2-2, NKX6-1, PDX1, MNX1 i MYT1 (Figura 6). Co ciekawe, w porównaniu z wysepkami ekspresja zarówno MAFA, jak i GLIS3 była szczególnie niska w niepoznanych komórkach, podczas gdy inne czynniki transkrypcyjne były wyrażane na podobnym poziomie jak w wysepkach. Po wycięciu transgenu w komórkach EndoC-aH2 obserwowano 8-krotny wzrost ekspresji MAFA (ta sama wielkość co indukcja insuliny) i 2,5-krotny wzrost ekspresji GLIS3 (Figura 6). Podsumowując, takie dane sugerują, że zwiększona ekspresja MAFA i GLIS3, która jest szczególnie niską w nieuwikłanych komórkach, może wyjaśnić istotny wzrost poziomu mRNA insuliny, który następuje po wycięciu z udziałem Cre. Rysunek 5 Udoskonalony. ekspresja genu specyficznego dla komórki. po wycięciu. Komórki EndoC-aH2 transdukowano wektorem lentiwirusowym eksprymującym Cre lub GFP i analizowano 21 dni później.
[patrz też: oriflame katalog 16 2015, porażenie piorunem, oriflame katalog 17 2014 ]