Przenoszenie wirusa ludzkiego opryszczki 8 Infekcja dawców przeszczepów nerki do biorców ad

Rozcieńczenie 1:10 stosowano do próbek surowicy od pacjentów. Do wykrywania przeciwciał IgG w surowicy zastosowano sprzężoną z peroksydazą kozią przeciwludzką IgG (Sigma, Buchs, Szwajcaria) (rozcieńczenie, 1: 2000); do wykrywania przeciwciał IgM w surowicy zastosowano komercyjny zestaw do wykrywania ludzkich przeciwciał IgM (Enzygnost, Behringwerke, Marburg, Niemcy) zgodnie z zaleceniami producentów. Aby uniknąć wyników fałszywie dodatnich, potencjalne czynniki reumatoidalne zostały wcześniej usunięte. Wartość graniczną IgG lub IgM dla każdej płytki określono przez obliczenie średniej . 5 SD wartości gęstości optycznej próbek surowicy od pięciu dawców krwi. Dwie reaktywne próbki surowicy od pacjentów z mięsakiem Kaposiego zastosowano jako kontrolę pozytywną dla każdej płytki. Wszystkie próbki surowicy zostały przetestowane na ślepo w dwóch egzemplarzach, a pozytywne próbki lub próbki o wartościach zbliżonych do wartości odcięcia zostały ponownie przeanalizowane co najmniej raz, aby potwierdzić wyniki. Wcześniej wykazaliśmy, że antygen 65,2 stosowany w teście ELISA nie reaguje krzyżowo z przeciwciałami przeciwko innym wirusom opryszczki.18
Wszystkie dostępne próbki surowicy od par dawcy-biorcy, jak również próbki, które były dodatnie pod względem HHV-8 w teście ELISA, zostały przetestowane jako sposób potwierdzenia przez pośredni test immunofluorescencyjny, który wykrywa przeciwciała przeciwko antygenowi jądrowemu związanemu z latencją, 16 jak opisano w innym miejscu, 18 i metodą Western blot z rekombinowanymi białkami or 65,2. 20
Analiza statystyczna
Seroprewalencja HHV-8 przed i po przeszczepie została porównana z użyciem testu McNemara w tabeli dwa na dwa .
Wyniki
Seroprewalencja przeciwciał przeciwko HHV-8 przed i rok po transplantacji
Tabela 1. Tabela 1. Serowartości HHV-8 przed i rok po transplantacji nerek u 220 pacjentów. W chwili przeszczepu próbki surowicy od 14 z 220 pacjentów (6,4 procent) posiadały przeciwciała IgG przeciwko HHV-8 mierzone za pomocą ELISA z orf 65,2 i test immunofluorescencyjny z utajonym antygenem (Tabela 1). Wyniki dla czterech próbek były graniczne w teście ELISA, ale negatywne w teście immunofluorescencji, a zatem uznano je za negatywne. Rok po transplantacji 39 pacjentów (17,7 procent) było seropozytywnych. Serokonwersja w ciągu pierwszego roku po transplantacji wystąpiła u 25 z 206 pacjentów (12,1 procent), którzy byli seronegatywni w kierunku HHV-8 przed przeszczepieniem (p <0,001 testem McNemara).
Seroprewalencja HHV-8 po transplantacji nerkowej
Ryc. 1. Ryc. 1. Czas serokonwersji u 10 biorców przeszczepu. Wartości dla IgG zostały uznane za pozytywne, jeśli były powyżej wartości gęstości optycznej odcięcia 0,6 (długość fali, 492 nm), a wartości IgM uznano za pozytywne, jeśli były powyżej wartości odcięcia 0,27 (długość fali, 450 nm), z wyjątkiem Pacjenci 4 i 6, u których dodatnie wartości IgM zdefiniowano jako te, które były ponad dwukrotnie wyższe niż poziom przedpransplantacyjny.
Figura 2. Figura 2. Reprezentatywne miana przeciwciał IgM i IgG wobec HHV-8 u dwóch biorców przeszczepu z serokonwersją w pierwszym roku po transplantacji. Wartości odcięcia są oznaczone kropkowanymi liniami dla IgM i liniami przerywanymi dla IgG.
Serokonwersja obserwowana u 25 pacjentów w ciągu pierwszego roku po transplantacji silnie sugerowała występowanie zakażenia przenoszonego przez dawcę
[przypisy: nutrend, atropina, Corsodyl ]
[podobne: oriflame katalog 8 2015, oriflame katalog 16 2015, pszczoła a osa ]